持續(xù)的疫情給實(shí)驗(yàn)室?guī)砹藟毫Γ蛊洳坏貌惶嵘ぷ鞯闹悄芑剑岣咝剩源_保盡可能地減少疫情對(duì)現(xiàn)有檢測體系的影響。因此，位于美國康科德，隸屬于新罕爾州公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室的蟲媒病毒檢測實(shí)驗(yàn)室采用了自動(dòng)化的樣本混合流程來進(jìn)行西尼羅病毒 (WNV) 和東部馬腦炎 (EEE) 病毒的檢測。

蟲媒病毒，專指所有通過節(jié)肢動(dòng)物攜帶者（如蚊子和扁虱）傳播的病毒，其中就包括西尼羅病毒和東部馬腦炎病毒，兩者均能經(jīng)由感染蚊子的叮咬感染人類。一些監(jiān)測項(xiàng)目能夠?yàn)槿绾螒?yīng)對(duì)這些蚊媒傳染病提供有價(jià)值的數(shù)據(jù)，公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室的蟲媒病毒檢測實(shí)驗(yàn)室所運(yùn)營的項(xiàng)目就是其中之一。

與各地的很多實(shí)驗(yàn)室一樣，疫情迫使蟲媒病毒檢測實(shí)驗(yàn)室對(duì)其蚊子監(jiān)測項(xiàng)目進(jìn)行了巨大的改變，采用了借助 ASSIST PLUS 移液工作站的自動(dòng)化混合樣本檢測工作流程。實(shí)驗(yàn)室主管Denise Bolton解釋說：“我們意識(shí)到，對(duì)于檢測物資的需求激增、有限的PCR儀器產(chǎn)能以及實(shí)驗(yàn)室工作人員的巨大壓力還將持續(xù)一段時(shí)間。早在疫情之前，我們就一直在考慮嘗試一種用于蟲媒病毒監(jiān)測的混合檢測模型，而現(xiàn)在，我們認(rèn)為是時(shí)候該實(shí)施這種方法了。"

轉(zhuǎn)向混合檢測

在研究了混合檢測方法并為實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)了方案后，他們通過檢測不同濃度的WNV/EEE陽性樣本組合進(jìn)行了“概念驗(yàn)證"。實(shí)驗(yàn)證明，在由4份試樣組成的混合樣本中，即使是非常低濃度的陽性樣本也能被檢出。“驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)顯示了很高的準(zhǔn)確度和靈敏度，我們在2020年夏天應(yīng)用了混合樣品檢測流程，初采用手動(dòng)進(jìn)行樣品混合。蚊子的處理是一項(xiàng)非常繁重的工作，很多步驟都需要打開和蓋上試管以及移取樣品，并且所有步驟都必須嚴(yán)格遵循安全流程來執(zhí)行。額外的樣品混合步驟讓整個(gè)步驟更加繁瑣了，需要占用實(shí)驗(yàn)員超過一小時(shí)，且需要高度的集中和專注。從質(zhì)控的角度來看，在處理過程之后增加一個(gè)手動(dòng)的混合步驟也是很有風(fēng)險(xiǎn)的，我擔(dān)心實(shí)驗(yàn)員可能會(huì)出錯(cuò)。"

降低出錯(cuò)概率

為了盡可能地降低出現(xiàn)手動(dòng)處理錯(cuò)誤的可能性，該實(shí)驗(yàn)室決定在一臺(tái)ASSIST PLUS移液工作站上將樣品混合過程自動(dòng)化。“我很熟悉ASSIST PLUS，因?yàn)槲覀冇盟鼇硖幚砦覀兊臉悠罚?Denise說。“隨儀器提供的VIALAB軟件讓編寫混合程序變得非常輕松，而INTEGRA移液器的靈活性意味著我們無需改變我們的蚊子處理方法。我們使用ASSIST PLUS配合一臺(tái)8通道的VOYAGER可調(diào)槍頭間距移液器來將試樣從2 ml試管中轉(zhuǎn)移到96孔板中，以構(gòu)建包含4份樣本的200 µl混合樣本。該過程完成后，ASSIST PLUS會(huì)直接將裂解緩沖液加入混合樣本，隨后整個(gè)混合樣本將被用于核酸提取。這簡化了處理過程，節(jié)省了時(shí)間并且減少了塑料實(shí)驗(yàn)室器具的使用，因?yàn)槲覀儾辉贅?gòu)建大體積的混合樣本然后移取等分來進(jìn)行提取了。如此應(yīng)用ASSIST PLUS讓我們得以將2個(gè)此前需要手動(dòng)執(zhí)行的步驟自動(dòng)化，實(shí)現(xiàn)了2個(gè)移液步驟的自動(dòng)化，實(shí)際上減少了對(duì)用戶輸入的需求。"

節(jié)省時(shí)間和經(jīng)費(fèi)

對(duì)蟲媒病毒監(jiān)測采用了混合檢測后，提取和PCR試劑節(jié)省了75%，監(jiān)測項(xiàng)目對(duì)PCR儀器的使用也減少了。“使用ASSIST PLUS移液工作站進(jìn)行樣本混合節(jié)省了實(shí)驗(yàn)員的寶貴時(shí)間，更重要的是，它讓我們確信整個(gè)過程中復(fù)雜的步驟正在無誤地執(zhí)行，"Denise 總結(jié)道。

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